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親子鑒定位點檢測結(jié)果是如何得出來的?(DNA提取物、基因擴(kuò)增儀)

時間:2022-03-22 15:08 閱讀:4430 來源:互聯(lián)網(wǎng)
回顧:2004年底,王納文一紙訴狀將足球明星高峰告上了法庭,稱自己的孩子是同高峰所生,雙方僵持不下,各執(zhí)一詞,讓人無法辨別。最后高峰提出通過親子鑒定的方法,鑒定孩子是不是自己的。這是國內(nèi)首例名人DNA親子鑒定案。

2004年11月18日,北京朝陽區(qū)中級人民法院在交換證據(jù)時正式公布了“高峰親子案”的鑒定結(jié)果,根據(jù)DNA檢驗顯示:王圣元與高峰有99.9999994%的可能性為親子關(guān)系。


99.9999994%,為什么DNA親子鑒定測試的準(zhǔn)確性會有這么高?


科學(xué)家在過去的研究中發(fā)現(xiàn),人與人之間的99.99%的遺傳密碼序列都相同,但又存在萬分之一的差別,使每個人都具備區(qū)別于他人的堿基序列,這就是DNA的多態(tài)性。(每個人多態(tài)性位點的差別就成為個人識別的標(biāo)志)根據(jù)遺傳學(xué)的傳遞規(guī)律,子女的身份標(biāo)記必定來自雙親,據(jù)此可用于親子鑒定。


親子鑒定位點檢測結(jié)果是如何得出來的?(DNA提取物、基因擴(kuò)增儀)

△基因序列中的atcg四個堿基


那么,99.99%以上的準(zhǔn)確率是如何得出來的?


目前,鑒定親子關(guān)系用得最多的是DNA分型鑒定。


第一步需要做待檢準(zhǔn)備,待檢物絕對不能混入其他雜質(zhì)。


第二步就是DNA提取。


目前,最為常見的是通過血斑進(jìn)行DNA鑒定,也就是說,要采集血樣做鑒定。


DNA提取常用方法一般采用“直擴(kuò)法”,也就是采用人類熒光標(biāo)記STR復(fù)合擴(kuò)增試劑盒(試劑盒里包含了DNA提取、擴(kuò)增所需的試劑)進(jìn)行PCR復(fù)合擴(kuò)增。血斑用打孔器打出所需的樣本大小,放入PCR反應(yīng)管中,加入反應(yīng)物緩沖液和引物混合體系,振蕩搖勻。


這是最為費(fèi)錢的一步,因為試劑盒是進(jìn)口的,每次加入的試劑費(fèi)用就要數(shù)百元。在進(jìn)入加樣區(qū)之前,實驗人員先打開紫外線消毒燈,對整個房間進(jìn)行消毒,確保加樣房間沒有任何的病菌及粉塵等,實驗者也盡量不要說話。


親子鑒定位點檢測結(jié)果是如何得出來的?(DNA提取物、基因擴(kuò)增儀)

△DNA實驗室

 

試劑里邊包括酶、引物等試劑,每個試管要加入0.2微升。加入試劑后,要將小試管放入小的混合器,讓試劑和DNA樣本充分混合。


第四步:擴(kuò)增,DNA提取物不斷繁殖分裂。為了能達(dá)到檢測需求的量,要把小試管放入一個叫做擴(kuò)增儀的儀器。把試管放入擴(kuò)增儀后,里邊的DNA提取物將不斷繁殖、分裂。在一般情況下,經(jīng)過2-3個小時的擴(kuò)增,DNA提取物的量就能達(dá)到檢測量。也就是說,要真正進(jìn)行DNA檢測、比對了。


第五步:檢測,提取21個基因位點數(shù)據(jù)進(jìn)行比對。檢測是在一個叫做遺傳分析儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳和基因分型。這種設(shè)備非常先進(jìn),把擴(kuò)增完的小試管放入儀器后,設(shè)備會自動從試管中提取DNA提取物,然后自動選擇DNA位點,分析染色體。在一般情況下,設(shè)備會自動提取21個位點,然后,系統(tǒng)自動將需要做親子鑒定的兩個樣本進(jìn)行自動比對。


根據(jù)遺傳學(xué)原理,如果所有的位點遺傳信息都能匹配成功,我們也就能大概說,這對父子或者母子是親子關(guān)系。當(dāng)然,這只是最簡單、最直觀的看法,要判斷孩子是否親生,還要經(jīng)過更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠嬎恪?/span>


計算時,有個親權(quán)指數(shù)(PI)計算,因為該公式類似于(p除以p+1)的模式,這個模式?jīng)Q定其結(jié)果不可能是整數(shù)。而且,因為世上沒有絕對相同的DNA,因此最高只能算出99.99%以上的準(zhǔn)確率。


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